A survey on gram-negative bacteria in saffron finches (Sicalis flaveola) from illegal wildlife tradein Brazil / Pesquisa de bactérias gram-negativas em canários-da-terra (Sicalis flaveola) resgatados do tráfico ilegal de aves no Brasil

Passerines such as canaries or finches are the most unlawfully captured species that are sent to wildlife centers in São Paulo, Brazil. Captured birds may have infection by opportunistic bacteria in stressful situations. This fact becomes relevant when seized passerine are reintroduced. The aim of this study was to evaluate the health state of finches from illegal wildlife trade using microbiological approaches. Microbiological samples were collected by cloacal and tracheal swabs of 100 birds, captured during 2012 and 2013. The results indicate high frequency of gram-negative bacteria in feces and oropharynx, especially from the Enterobacteriaceae family (97.5%). The most frequent genera were Escherichia coli (46.5%) and Klebsiella pneumoniae (10.4%). Enterobacter cloacae, Serratia liquefaciens, Serratia spp. Klebsiella oxytoca and Citrobacter freundii were isolated with lower frequency from asymptomatic birds. The presence of enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) and Shiga toxinproducing strain (STEC) confirm the zoonotic risks and public health concern.(AU)

No Estado de São Paulo, Brasil, os pássaros como os canários-da-terra têm sido uma das espécies mais frequentemente resgatadas do tráfico ilegal e enviadas aos centros de vida selvagem. Em situações de estresse estas aves podem ser acometidas por infecções causadas por bactérias oportunistas. Este fato é de grande importância quando é planejada da reintrodução das aves na natureza. O presente trabalho foi delineado para avaliar o estado de saúde de canários-da-terra resgatados do tráfico ilegal. Foram colhidas soabes da traqueia e da cloaca de 100 aves resgatadas durante os anos de 2012 e 2013. Os resultados obtidos revelaram alta frequência de bactérias gram-negativas nas fezes e no orofaringe dos animais, com maior frequência para os membros da família Enterobacteriaceae (97,5%). Os gêneros mais frequentes foram Escherichia coli (46,55) e Klebsiella pneumoniae (10,4%). Outros microorganismos incluindo Enterobacter cloacae, Serratia liquefaciens, Serratia spp, Klebsiella oxytoca e Citrobacter freundii também foram isolados em menor frequencia de aves assintomáticas. A presença de estirpes de Escherichia coli enteropagênicas (EPEC) e as produtoras da toxina de Shiga confirmam o risco de zoonose e a importância para saúde pública deste tipo de ave.(AU)

A fully validated microbiological assay for daptomycin injection and comparison to HPLC method

abstract Daptomycin (DPT) was the first lipopeptide antibiotic available for commercialization. It is active against gram-positive bacteria, including resistant strains. This work aimed to develop and validate a turbidimetric microbiologic assay to determine daptomycin in an injectable form. A 3x3 design was employed, at concentrations of 1, 2 and 4.0 µg/mL. The microorganism test used was Staphylococcus aureus ATCC 6538p, and Antibiotic Medium 3 was used as the culture medium. Method validation demonstrated that the bioassay was linear (r=0.9995), precise (RSD=2.58%), accurate (recovery 100.48± 2.11%), and robust. Degradation kinetics was also performed in an alkaline medium, indicating that daptomycin degradation follows first order kinetics under these conditions. The analyses of degraded solutions showed that daptomycin degradation products do not possess bactericidal activity. The bioassay was compared to HPLC method that was previously developed and no significant difference was found between them (p>0.05). The method proved to be appropriate for daptomycin injection quality control.

resumo A daptomicina (DPT) é o primeiro lipopeptídeo cíclico disponível para comercialização. Possui atividade frente a bactérias gram-positivas, incluindo cepas resistentes. O objetivo deste trabalho foi desenvolver e validar um ensaio microbiológico turbidimétrico para quantificar a daptomicina na forma injetável. Empregou-se delineamento 3x3, nas concentrações de 1,0; 2,0 e 4,0 µg/mL. Como micro-organismo teste foi usado Staphylococcus aureus ATCC 6538p, e Meio para Antibióticos nº 3 foi empregado como meio de cultura. A validação do método demonstrou que o ensaio foi linear (r=0,9995), preciso (RSD=2,55%), exato (recuperação de 100,48 ± 2,11%) e robusto. A cinética de degradação em meio alcalino foi avaliada, indicando que a daptomicina segue cinética de primeira ordem nessa condição. A análise das soluções degradadas mostrou que os produtos de degradação da daptomicina não possuem atividade antimicrobiana. O bioensaio foi comparado com o método por CLAE previamente desenvolvido e não houve diferença significativa entre ambos (p<0,05). O método mostrou-se apropriado para o controle de qualidade da daptomicina injetável.

Comparison of thermotolerant coliforms and Escherichia coli densities in freshwater bodies

Fecal bacterial indicator analyses have been widely used for monitoring the water quality. This study was designed to determine the ratio between the density of Escherichia coli and other Thermotolerant Coliforms (TtC) bacteria from freshwater samples collected for a two-year period of monitoring. TtC were enumerated by membrane filtration on mFC agar. E. coli enumeration was done by two methods: TtC colonies identified in mFC were inoculated in EC-MUG or water samples were filtered and inoculated in modified mTEC agar media, and both methods were compared for quantitative recovery of E. coli. The results pointed out a mean percentage of E. coli among other thermotolerant coliforms (E. coli/TtC ratio) of 84.3% in mFC media. Taking these results into account, a mandatory standard of 1000 thermotolerant coliforms would correspond to 800 E. coli and the adoption of these E. coli based standards will represent a major improvement for the monitoring of freshwater quality.